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药物代谢在新药研发中的应用及代谢产物鉴定技术

发布时间:2020-06-01  浏览人数:1人

1. 药物代谢的基本概念

药物代谢指药物在体内多种药物代谢酶的作用下,化学结构发生改变的过程,又称生物转化。药物在体内生物转化后的结果有两种: 一是失活,成为无药理活性药物; 二是活化,由原来对某些脏器靶点无药理活性成为有药理活性的代谢物甚至产生有毒的代谢物。也有药物的代谢产物仍保持其原有药理作用。如非那西汀转化成对乙酰氨基酸,前者为上市的药,后者为前者的代谢产物因其比前者药效更好,毒性更也被开发为新药。

药物的代谢反应大致可以分为氧化(oxidation)、还原(reduction)、水解(hydrolysis)和结合(conjugation)四种类型相代谢可为氧化、还原和水解反应相代谢为结合反应。有些药物可以同时通过几种不同类型反应进行代谢。肝脏是药物的主要代谢器官,富含相代谢和相代谢所需的各种酶催化相代谢的主要是肝微粒体中的CYP450酶,催化相代谢的主要是尿苷二磷酸葡醛酸转移酶(UGTS)、N-乙酰基转移酶(NATs)、甲基转移酶(MTs)、谷胱甘肽转移酶(GSTs)、硫酸转移酶(SULTs。除肝脏外,有些药物还存在肝外代谢,如肠道、血、肾、肺、脑等。

 

2. 代谢物鉴定

2.1 使用LC-MS进行代谢物的鉴别(Metabolite profiling and identification

2.1.1 预判:

一般情况下需要根据化合物的基本结构对代谢反应发生的位点进行预判,下表中总结了一些常见代谢反应发生的位点。

在实际过程中,常常同时发生多项代谢反应,或者同一个位点相继发生一连串的代谢反应,形成较为复杂的代谢产物,大大增加代谢物鉴定的难度。此时,可通过CompuDrugADMET predictorMetaSite等一些商业化软件进行代谢物的预测,此外,SCIEXMetabolite PilotLightsightWATERSmetabolynx也供了相应的代谢物鉴定功能,并且能方便的与自家质谱仪相连进行在线分析。

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2.1.2 检测:

高分辨质谱(HRMS)无疑是代谢物鉴定的利器如四极杆飞行时间Q-TOF质谱、四极杆-轨道阱QExactive线性离子阱四级杆-轨道LTQ-Orbitrap傅里叶变换离子回旋质谱( FT-ICR-MS)。高分辨质谱仪具有高灵敏度、选择性、准确度和动态范围,提供了母离子和碎片离子的精确分子量测定(根据分辨率不同,精确到小数点数),结合MZ cloudChemspider等数据库进行分子式匹配,可以较为精确的推测代谢物母离子和子离子的分子式,对代谢物结构进行解析,进一步结合原型和代谢产物的保留时间和多级质谱裂解规律,综合推断,可用于复杂基质中的微量代谢产物的分析和鉴定。下表提供了常见质谱仪的分辨率信息。

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相比于高分辨质谱,传统的QqQQ-Trap质谱仪同样也可以代谢物的初步鉴别,其分析技术策略主要是基于多数药物代谢以后仍保留了部分原药分子骨架结构和一些亚结构, 因此通过碰撞诱导裂解(CID)可丢失相同的中性碎片或形成相同的特征, 通过中性丢失、母离子扫描、子离子扫描、质量亏损过滤等技术可找出可能的代谢产物进行结构推导。

 

下面介绍应用LC-MS进行代谢物鉴定的常用模式及技术

背景扣除(BS

BS是基于特定算法,从给药后生物样本的质谱数据中扣除空白样本内源性本底干扰信号,选择性检测代谢产物的技术。BS基于保留时间和离子的准确质量从分析物样本中扣除干扰离子(从总离子中区分背景、基质相关离子药物相关离子),使用时需设置一定的RT windowMass error范围。该策略能够快速净化谱图,去除干扰,检测体内外的代谢产物,不需要假设它们的分子量、裂解类型和质量亏损。此外,SCIEX 5600 Q-TOF/MS提供了动态背景扣除(DBS)功能,在进行质谱信号采集的同时进行背景扣除,极大降低本底背景的二级质谱信号强度,以提高样品中极低含量内源性成分掩盖目标物MS/MS信号。

 

质谱全扫描

一般对于样品首次代谢物分析时采用全扫描,通过运行一个通用的LC-MS方法以获得全面的代谢物谱首先根据第一步预判得到的可能存在的代谢产物,建立预期代谢产物数据库(包含分子式和结构式),然后将全扫描MS谱图导入相关软件(如Peakview),输入目标代谢物分子式,提取离子谱图EIC),综合EIC中各代谢物的保留时间和二级质谱碎片信息进行代谢物的鉴定

 

中性丢失(Neutral loss)、前体离子(Precursor ion扫描、子离子(Product ion过滤

中性丢失和前体离子扫描可用于与原型药物或者已知代谢产物具有相似裂解规律的代谢产物的寻找。

前体离子扫描/产物离子过滤基于大多数药物代谢后仍保持原有母核,有助于寻找那些生成某些相同子离子碎片的代谢物的筛查。如,谷胱甘肽和谷胱甘肽结合物在负离子模式中均呈现一个高丰度的碎片m/z 272GSH脱去SH),因此,m/z 272可以用于GSH结合代谢物的特征检测,用以筛查反应性代谢产物的形成大多数相代谢产物与原药在结构上有很大的相似性,可用于相代谢产物的检测。

中性丢失扫描是三重四极杆串联质谱仪所独有的数据采集方式之一它的主要工作原理是一级质谱(MS1)和二级质谱(MS2)同时扫描MS2MS1始终保持质量差Δm , 最终的图谱将显示那些来自一级谱图中通过裂解丢失中性碎片(Δm)的离子。多数药物的代谢物保留了原药分子的结构特征, 在质谱中会丢失一些相同的中性碎片,并形成一些相同的特征离子, 应用中性丢失扫描可迅速找到具有特定官能团的代谢物。如葡萄糖醛酸结合物发生碰撞诱导解离时丢失一个中性的葡萄糖醛酸(176u)电荷会滞留在原药分子碎片上。

1为抗寄生虫药硝唑尼特(nitazoxanide)的代谢途径,该药口服后在体内迅速被代谢成具有活性的替唑尼特(tizoxanide), 然后被葡萄糖醛酸化为葡萄糖醛酸替唑尼特(tizoxanide glucuronide), 设置中性丢失扫描分子量为176,检测出[M-H]- m/z 440的葡萄糖醛酸替唑尼特的质谱峰。

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1  硝唑尼特的代谢途径和中性丢失扫描质谱峰

产物离子过滤和中性丢失过滤技术依赖于代谢产物MS/MS谱的有效性,以及代谢产物与那些母体药物或己知代谢产物的裂解规律的相似性。基于代谢产物预期的碎片离子或裂解规律,从所分析的复杂样本中发现代谢产物,可以结合使用多个产物离子或者中性丢失进行数据筛选和挖掘。下表中总结了常见的产物离子过滤和中性丢失过滤的碎片信息,供参考。

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GSH Trapping技术:用于特异性捕捉谷胱甘肽结合物,其综合运用中性丢失和前体离子扫描,策略如下:

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 质谱目标离子扫描(MIM/MRM) 首先要预测 

可以借助代谢转化数据库预测可能存在的代谢产物,建立预期代谢产物母离子和子离子的m/z值目录。此类数据库是基于每个检测化合物的结构独特性,判断可能发生的代谢位点和代谢物的可能碎片,能够过滤谱图,提高分辨率和选择性。选择离子监测技术的最大限制是对非常规或者由多重代谢转化反应形成的代谢产物的发现不全面。

 

对于QTRAP质谱仪,可以在MIM/MRM的基础上进行信息依赖(IDA-增强子离子扫描(EPIMIM-IDA-EPIMIM-IDA-EPI在得到MIM/MRM信号的同时,获得其二级扫描质谱图,可以进一步用于定性分析。EPI还支持与中性丢失扫描结合,NL-EPI常用用于监测II相代谢产物。MIM-IDA-EPI用于监测 相代谢产物。

MIM扫描需要设置质量范围,通常根据原型化合物的分子量(MW)来设置。设置范围为原型m/z-50 ~ +50通常可以涵盖大多数 相代谢产物的分子量变化范围,同时又可以兼顾扫描速率和分辨率(注意:当化合物含有N-烷基、O-烷基、酯键时,则有可能发生 N-去烷基、O-去烷基、水解等反应。这时其分子量的变化可能会超过-50 Da 的范围,则需调整范围)。2 amu的增量进行stepwise MIM-IDA-EPI(含氮化合物则需要进行1 amu增量),共计50 个离子对,同时设置合适的IDA阈值过滤噪音(如设置IDA阈值为5000,则只有离子强度高于5000 cps 的离子将通过IDA触发EPI扫描)。

NL-EPI扫描的设置方法也类似。例如通过扫描中性丢失176 Da来监测葡萄糖醛酸结合物,扫描质量范围可以设置为 m/z -50+GluA~ m/z +50+3GluA扫描质量上限根据可结合葡萄糖醛酸的位点进行改变)

 

⑤ 质量亏损过滤Mass defect filter, MDF(高分辨质谱采用)

在质谱领域,所谓质量亏损指的是一个元素(或者一个化合物)的精确质量数和它最接近的整数值之间的差异。由于代谢产物的质量亏损的变化通常位于相当窄的范围内,基于母体药物和被选择的核心亚结构的质量亏损,可以估计这些代谢产物的质量亏损落在什么区间,预先设定过滤标准,采用质量亏损过滤,在全扫描MS数据集中从干扰离子中过滤代谢产物离子,将所有落在期望范围之外的离子排除,从而挖掘出可能的代谢产物。MDF方法检测代谢产物,依赖于代谢产物与过滤模板间的质量亏损的相似性,不需要考虑代谢产物的裂解类型。MDF技术可有效去除扰离子,得到干净的色谱图,简化质谱的解析

质量亏损过滤般包括以下两个步骤一是设定过滤模板,主要包括药物模板,结合物模板(谷胱甘肽结合物Ⅱ相产物)和亚结构模板(如黄苷的亚结构可以是黄芩素)。第二步是在模板的基础上,设定质量范围和质量亏损范围,一般来说,质量范围设定值为±50Da,质量亏损范围值为±50mDa(大部分的代谢途径产生的质量亏损在±50 mDa以内)。随着软件的发展,多重质量亏损过滤也开始广泛的应用于代谢产物的條选,多重质量亏损技术与质量亏损过滤的区别就在于能设定多个质量和质量亏损范围。如右美沙芬(C18H25NO),单同位素分子量为271.1936其代谢物O-去甲基右美沙芬(C17H23NO),单同位素分子量为257.1780,两者的分子量相差14.0156,质量亏损差为15.6 mDa

 

⑥ 同位素模式过滤(isotope pattern filter, IPF(高分辨质谱采用)

同位素过滤技术是用于筛查具有不同同位素模式的代谢产物研究技术,包括天然同位素和放射标记的同位素,根据特定化合物的同位素丰度比例,对MS谱图进行过滤。由于氯(C1-35, 75.78%; C1-37, 24.22%;)和溴(Br-79, 50.69%; Br-81, 49.31%)具有特殊同位素丰度比,在过去的几十年中,IPF主要用于研究含C1Br的化合物或者稳定同位素标记和化合物在代谢研究时,可以对化合物进行人为的同位素标记,通过在不同代谢位点合成含特定同位素的化合物,如含2H, 13C, 15N, O1834S, 与未标记化合物进行对照,通过比较代谢前后化合物的质量数变化和同位素丰度变化,判断代谢的位点和类型具有高的选择性和低的信噪比。缺点是同位素化合物的制备价格比较

 

SWATH技术

四极杆串联飞行时间质谱主流的数据采集方式主要分为数据依赖采集(Information Dependent Acquisition, IDA采集技术)和数据非依赖采集(Sequential Windowed Acquisition of all Theoretical fragment ionsSWATH®采集技术)两种方式。

数据依赖采集方式二级质谱只能采集一级谱图中信号最强的数个离子,且采集到二级碎片的多少受各种条件限制,比如选择需要打碎的前体母离子个数较多时则需要仪器扫描速度较快,否则循环时间变长扫描点数减少影响数据质量,因此对于含量低的目标药物代谢物的检测效果不佳

SWATH®采集技术是一种真正全景式的、高通量的、数据可追溯的质谱技术特点是可以实现所有进入碰撞池(Q2)的一级离子都进行二级碎裂,而不用受一级离子的响应高低或者质荷比大小等条件的限制在待检测的质量范围内,Q1是按照方法设定好的固定窗口或可变窗口(Window  Size),将该质量范围划分成几个或几十个小的质量范围,然后将这些小的质量范围依次传输到Q2打碎,获得每个小质量范围内的、所有母离子的、碎片信息,同时可以对二级碎裂电压CE进行滚动变化的设置,使得一次进样所有不同结构类型的化合物都能得到丰富的二级碎片离子信息。

MSALL模式相比,SWATHMS/MS扫描时,Q1是分段将母离子送到Q2,传输离子窗口小,自然能更大化保证离子传输效率,能提供更好的MS/MS谱图质量,从而保证类MRM定量灵敏度。另一方面,因为SWATHMS/MS谱图仅仅是小质量范围内的母离子所打出来的,减轻后期去卷积的压力,保证了去卷积后MS/MS谱图的质量。和IDA采集模式相比,SWATH 能提供二级定量信息,同时也能采集更全面化合物的MS/MS信息

SWATH可以MRM方法进行连接,利用SWATH 全景扫描的特点,采集不同CE能量下的MS/MS信息,使用软件筛选形成特征MRM离子对信息,然后MRM信息无缝转移到三重四极杆仪器上进行大批量样本的测定。大连化物所许国旺研究员实验室推出将该方法成功应用于二型糖尿病差异化合物的发现。

实际工作中,常常根据化合物特征综合运用以上几种方法进行代谢物鉴定,同时联用紫外检测器(UV判断化合物的基团特点。下图中总结了代谢物鉴定的通用步骤:


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2.1.3 解析:借助高分辨率质谱,可以通过高精度质荷比的变化准确指出分子式的变化,从而进行更准确的解析。同时根据碎片的归属及其质荷比的变化,推断代谢发生的位点。对于含氮化合物,氮律有助于质谱分析中判断分子离子峰质量数CHON组成的化合物含奇数个N,分子离子峰的M/Z是奇数含偶数个N,分子离子峰的M/Z是偶数ESI质谱中更容易形成准分子离子[(M+H)+(M-H)-],在运用氮律时需加以区分。

2.1.4 定量应首先考虑合成标准品,采用LC-MS/MS进行定量;也可使用放射性同位素标记的原型药物(如14C)进行体内代谢研究,结合LC串联放射性检测器进行定量分析;对于未知代谢物或无标准品的代谢物,在保证色谱峰良好的情况下采用LC-UV进行半定量也是可以接受的

 

2.2 代谢物的结构确证

通常使用NMR结合MS/MS数据可以较为准确的进行结构确证。药物代谢后结构发生变化,在NMR谱图中,会带来化学位移、耦合常数和信号强度的变化,在MS/MS谱图中,根据碎片的归属及质荷比的变化可以判断代谢位点。

核磁共振对样品纯度要求较高,且受制于灵敏度的限制,代谢物具有较高的浓度才能满足检测限要求无论使用哪种方法,首先均代谢物进行制备,制备方法主要有化学合成法和生物转化法。有些代谢物结构复杂,化学合成难度大成本高,且对于未知化合物存在失败风险,目前生物转化法较为常用。

下图展示了代谢物结构确证的一般步骤。

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此外,还可借助于同位素标记将稳定同位素标记于原型药物结构中,通过比较标记和非标记化合物经代谢转化后分子量的变化情况和MS/MS谱图规律,进行结构确证和代谢位点的识别。

 

3. 药物代谢在新药研发中的应用

3.1 指导药物设计

药效学、药动学和毒理学共同构成了一个三位一体的新药筛选和评价体系,药物代谢在其中起着重要的桥梁作用。通过体内外代谢研究,可以确定药物在体内的主要代谢方式、代谢途径及主要代谢产物,并在此基础上对原型药物及其代谢物的活性/毒性开展进一步的比较和分析,来阐明药效/毒性产生的物质基础,为药效学和毒理学评价提供重要线索。

在药物发现阶段,通过药物代谢筛选有望及时发现某些候选化合物代谢性质不佳的缺陷并及时采取措施。如通过结构修饰减少代谢不稳定性质,通过合理分子设计避免反应性代谢物;可根据代谢产物的结构推测易代谢位点和产生毒性代谢物的位点,并根据这些信息进行结构的优化等。有些代谢物保持着一定的药理活性,且其本身对机体的毒性可能更小,可用于寻找具有药理活性的新分子,如非那西汀的活性代谢产物扑热息痛,拥有更好高活性和低毒性等特点,被进一步开发成为的镇痛作用更好和不良反应更轻的新药

 

3.2 试验动物物种确立

药物在动物体内产生的毒性能否反映其在人体内的毒性是毒理实验能否成功的关键。由于某些药物毒性具有种属特异性性,这种差异也可进一步分为量或质的差异。造成这种差异的原因大多数是由于种属代谢差异造成的,因此药物的代谢特征是非临床安全性评价中动物试验,尤其是毒理试验,种属选择的重要依据。早期进行体外代谢研究能够帮助我们了解不同种属动物与人之间的代谢方式和途径差异,为毒理动物试验的种属选择提供依据,即尽可能选择与人代谢相近的动物进行毒理研究,并在毒理研究中对动物体内的主要代谢产物进行测定,为进一步的临床人体代谢研究打下良好基础。对于化学药物,根据指导原则要求选择一种啮齿类和非啮齿类动物,通常能涵盖大部分毒性研究要求。

3.3 审评部门对新药药物代谢的考虑

代谢产物代表着作为异物(Xenobiotic)的原形药之外的新异物,也意味着其自身可能具有新的安全性隐患。 因此药物研究中不但要重点关注原形药同时也需要对代谢产物进行探索研究。

在药物开发过程中确定药物的代谢特征,可以在不同发阶段,通过体外和体内试验方法来完成。体外试验可采用不同动物和人体的肝微粒体、肝脏切片或肝细胞动物毒性试验开始前进行。非临床试验动物不同种属中的体内代谢试验通常应在药物开发早期进行,其结果可以证实体外试验获得的结果,或提示动物种属间代谢存在的质和/或量的差异,从而了解供试验药品可能潜在的安全隐患。人体的体内代谢试验对药物开发后期剂量选择和临床观察有重要意义因此人体内代谢研究应尽早进行

根据ICH S3ANote For Guidance On Toxicokinetics: The Assessment of Systemic Exposure in Toxicity Studies中对代谢产物的测定有如下描述:

毒代动力学的主要研究目的是描述受试物在毒性研究动物种属中的全身暴露情况。然而在下列情况中,为了证实人体代谢产物有足够的毒性研究,在非临床毒性试验中需要获得这些代谢产物的暴露数据时,代谢产物浓度的测定可能是非常重要的。

受试物为前药且其代谢产物已知为主要活性成分。

受试物可被代谢为一种或多种具有药理或毒理活性的代谢产物,且代谢产物导致明显的组织/器官反应。

受试物在体内被广泛代谢,毒性研究仅可以通过测定血浆或组织中的某一主要代谢产物浓度进行暴露评估(代谢产物测定作为毒动力学评价的一部分仅能提供暴露的评价,而不能证明可能的活性中间产物)。

 

3.4 代谢物安全性评价(Metabolites in safety testing, MIST

关于MIST法规,主要有如下几项:

ICH M3(R2): Guidance on nonclinical safety studies for the Conduct of Human clinical trials and marketing authorization for pharmaceuticals, 2009.

US FDA: Safety Testing of Drug Metabolites Guidance for Industry

CFDA 2015 药物代谢产物安全性试验技术指导原则

一般来说,对于人体中稳态暴露量(通常以AUC计算)药物相关总暴露量(原型+代谢产物)的10%的循环代谢产物,至少应该在毒理学1个试验动物种属中观察到相似或更高的暴露量。通常情况下,通过测定稳态时血清或血浆中药物浓度来分析系统暴露量,但如果由于某种原因无法在受试动物的血浆中测定时,则可通过测定代谢产物在其他生物基质的水平以验证暴露是否充分,如尿液、粪便或胆汁。

而对于高比例药物代谢产物:即仅存在于人体的代谢产物,或在人体循环系统的暴露量显著高于a非临床试验所用动物中暴露量的代谢产物应给予关注。应当尽早确证人体中可能存在的高比例代谢产物,如果在体外代谢研究提示有人体的高比例药物代谢产物,可考虑开展动物和人体的放射性同位素标记法的代谢研究,为开展高比例药物代谢产物的临床前安全性研究提供依据。通常在期临床FIH单剂量爬坡(SAD)试验中首次进行人体内代谢研究,对于高比例代谢产物,在多剂量爬坡(MAD)试验中比较人体和动物的稳态暴露量(参考蓄积、非线性PK等因素),以确认临床前毒理动物的选择,决策是否开展MIST研究,并支持后期3-6个月长期毒理试验的种属选择。

a注:显著高于并不代表统计学上的更高水平。在毒代动力学评价中,通常将≥ 2倍(平均)AUC的差异视为有毒理学意义。因此,当动物中的暴露量为人体暴露量的50%以上时,一般认为对代谢产物的毒性表征是足够的。在某些情况下,当一个代谢产物占人体总暴露量的绝大部分时,动物中该代谢产物暴露量应超过人体(如前体药物)。在这种情况下,因为该代谢产物占人体暴露量的绝大部分,在动物中获得该代谢产物的更高暴露是非常重要的。

关于MIST的决策流程图如下:

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对于动物中暴露量不能达到人体暴露量的,可能需要进行以下试验来评价高比例药物代谢产物的安全性:一般毒理试验、遗传毒性试验、胚胎-胎仔发育毒性试验、致癌性试验。对于此类试验一般有两种方法,第一种方法:确定一种常规毒理学试验中的动物种属,在该动物种属上能形成充分暴露水平的该代谢产物,然后在该动物种属中研究药物毒性;第二种方法:如果不能确定一种形成该代谢产物的相关动物种属,则可合成该代谢产物,通过掺入法或直接给药来开展进一步的安全性评价。

对于一些没有毒性担忧的代谢产物(例如,大多数谷胱甘肽结合物),不需要进行非临床评价(但谷胱甘肽结合物可能是药物生成反应性代谢产物的信号,产生严重的肝损伤,需进行额外的安全性评价,但不属于MIST范围)II相结合反应通常会使一个化合物的水溶性增加并失去药理学活性,故通常也不再需要进一步评价。但是,如果结合反应形成一种毒性化合物如乙酰葡萄糖醛酸acylglucuronide),则可能需要进一步的安全性评价。

对于具有重大治疗利益的药物,以及用于尚缺乏有效治疗手段疾病的药物,代谢产物的非临床试验的数量和类型可根据具体情况具体分析的原则进行调整。晚期癌症患者治疗时,这些代谢产物并不要求必需开展单独的毒理评价,针对抗肿瘤药物的代谢产物的安全试验可参考ICH S9指导原则。


4 展望

新药研发是一个投入巨大,耗时极长,失败率极高的高风险项目,药代动力学研究贯穿于新药研发的整个过程,是成药性评价的关键性部分。药物代谢研究对阐明药物科学本质,明确药物毒效的物质基础,指导结构优化及提高新药研发的成功率具有重大意义。针对药物分子的多样性和复杂的体内过程来建立快速、高效而准确的代谢物分析研究体系对缩短研究周期、降低成本、提高成功率是非常重要的。笔者认为可以以结构为导向,综合文献数据和实验室研究已有结果,建立化学结构-代谢反应-药效/毒性数据库,并运用人工智能技术和大数据分析方法,探索其中的定量结构代谢关系(QSMR)和定量构效关系(QSAR),建立相关构--效模型,并通过不断增加的数据集对模型进行逐步的训练、训练和优化,最终运用于化合物的高通量新药筛选。

药物代谢研究也是打开中医药宝库的钥匙。中医药学是中国传统科学技术的瑰宝,其自身拥有独特的理论体系和临床使用广泛普及等特点。然而,中药的物质基础和作用机制大多尚不能明晰,这是制约中医药现代化和国际化的瓶颈之一。炮制和配伍是中药的两大显著特征,也需要现代的分析方法的支撑来验证其减毒增效,提高疗效,扩大临床应用范围等原理和物质基础的阐明。中药经炮制配伍后产生的新的活性物质,可能会作用于机体的某些代谢酶,发生药物代谢性相互作用,进而造成疗效和毒性等系列变化。从药物代谢出发,结合代谢酶的个体和种族的多态性特征,从代谢、代谢相互作用角度研究中药炮制、配伍等作用关系,建立中国特色的中药代谢研究体系,有助于进一步揭示炮制和配伍的本质规律,并为新药研发提供更多的候选物质。